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微生物知识点35（第3页）

4卵黄囊

5脑内

6静脉

很多哺乳类病毒不在鸡胚上生长（不适应）→牢记！！实验需掌握

鸡胚培养病毒的优点和缺点

优点：经济、简便、鸡胚易得

缺点：

1有些鸡胚带有母源抗体

2也可能带有病毒

3很多病毒在鸡胚中不生长

2.2.3细胞培养：

1将离体活组织块或分流的活细胞加以培养统称为组织培养，后者又称单层细胞培养。

2细胞培养适于绝大多数病毒生长，是病毒实验室的常规技术。

细胞培养的特点：

（1）细胞的生理特性基本一致

（2）对病毒的感染性一致

（3）没有实验动物的个体差异

（4）重复性好

（5）与实验动物相比，通过观察细胞病变或结合免疫学技术检测判断结果。

（6）可通过病毒细胞培养产生的空斑进行克隆纯化病毒。

细胞培养的类型

根据细胞的来源、染色体特征及传代次数，可分为三种类型:

（1）原代细胞

（2）二倍体细胞株

（3）传代细胞系

原代细胞：

1动物新鲜离体组织块（剪成小块）经胰蛋白酶消化、分散，获得单个细胞，再生长与培养器皿中。

2有人把培养的第1代细胞与传1o代以内细胞统称为原代细胞。

3分离病毒最为敏感，尤其是本动物的原代细胞。

二倍体细胞株：

1将长成的单层原代细胞消化分散成单个细胞继续培养传代，其染色体数与原代细胞一样保持其二倍体型的染色体，称为二倍体细胞。

2如：猪肾细胞系（pk-15）、犬肾细胞系mdck。

3可传至一百代左右

4用于病毒分离和疫苗制备

传代细胞系：

1能在体外持续增殖传代的细胞系，大多数由癌细胞或二倍体细胞突变而来

2方便易得

3用于病毒的分离鉴定和抗病毒药物筛选研究。